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三溴化磷在酪氨酸酶的制备反应中的应用

  酪氨酸酶(tyr)是一种细胞质黑素细胞分化蛋白,通过将酪氨酸氧化为醌在黑素生物合成中发挥重要作用。下面就给大家介绍一下在酪氨酸酶的制备反应中三溴化磷的应用。

  酪氨酸酶活性的传统检测方法包括比色法、电化学、光化学和拉曼光谱,然而,目前用于酪氨酸活性检测的化学传感器存在一些缺点,如斯托克斯位移小、检测时间长、易受活性氧干扰、检测限高和水溶性差,因此,开发能够克服上述缺点的新型化学传感器的任务尤为紧迫。

  提供了一种能够以高选择性和灵敏度检测酪氨酸酶活性的近红外化学传感器分子,将环己酮加入到三溴化磷、二甲基甲酰胺和二氯甲烷的混合溶液中(溶液温度为0℃),然后加热反应,反应中的摩尔比为1:1.1,二甲基甲酰胺与二氯甲烷的体积比为0.224:

  将4.48ml二甲基甲酰胺和20ml二氯甲烷混合后,冷却至0℃,在剧烈搅拌下逐滴向系统中添加,然后在30分钟后向系统中添加4.9ml环己酮。在室温下将系统搅拌12小时,然后将其倒入30ml纯水中,并用碳酸氢钠中和。水相用60ml二氯甲烷萃取三次。将有机相合并并用无水硫酸钠干燥,并通过旋转蒸发去除溶剂以获得黄色油性固体化合物。

  未经纯化,该化合物直接用于下一反应。取化合物1(0.204g,1.08mmol)溶解于6ml二甲基甲酰胺和4-甲氧基水杨醛(0.137g,0.9mmol)中。在剧烈搅拌下,向系统中添加碳酸铯(0.88g,2.7mmol)。在室温下搅拌系统24小时,然后向系统中添加60ml二氯甲烷,用水冲洗三次(每次20ml),合并有机相并用无水硫酸钠干燥,通过旋转蒸发去除有机溶剂以获得固体。以二氯甲烷为洗脱剂,通过柱层析得到亮黄色化合物。

  将甲基喹啉(0.48g,3.35mmol)和碘乙烷(0.78g,5mmol)溶解于25ml乙腈中,加热至80℃并回流12小时。通过旋转蒸发除去溶剂后获得的固体用乙醚超声过滤。过滤产物用乙醚漂洗三次并真空干燥,得到绿色固体化合物3(产率88%),无需进一步处理即可直接用于下一反应,三溴化磷的添加的量和环己酮是相关的,两者的的添加含量是有一定比例的。

  酪氨酸酶可以应用于生物体内酪氨酸的荧光成像,在提高生物体内酪氨酸酶产生机制的研究水平,促进酪氨酸酶的相关研究有良好的应用前景。

三溴化磷


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